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GANEM, Solange Teixeira de Souza. Bactérias endofíticas em explantes e micropropagação de bananeira tetraploide. 2008. 94 p. Dissertação (Mestrado em Produção Vegetal no Semiárido) – Universidade Estadual de Montes Claros, Janaúba, 2008.
O trabalho foi realizado no Campus de Janaúba da Universidade Estadual de Montes Claros com o objetivo de avaliar dois protocolos de assepsia e um de multiplicação in vitro das cultivares Galil 18 e Tropical bem como identificar em nível de espécie os isolados de bactérias provenientes das contaminações dos ápices caulinares dessas cultivares de bananeira. Os explantes das cultivares foram submetidos a dois protocolos de assepsia DES1 e DES2 e a quatro diferentes concentrações de BAP 1,0, 3,0, 7,0, e 9,0 mg L-1 e mais uma dose testemunha de 5,0 mg L-1 de 6-benzilaminopurina. Foram avaliadas as características de porcentagem de contaminação, taxa de multiplicação, número total de explantes, comprimento e diâmetro do pseudocaule das mudas in vitro e na fase de aclimatização. As contaminações foram exclusivamente de origem bacteriana. Diferenças significativas foram observadas entre os métodos de assepsia apenas para a ‘Tropical’ (χ 2 = 0,0291), o método de assepsia 2 promoveu o menor índice de contaminação, com média de 7,14%. Nenhum dos doze isolados avaliados apresentou reação de hipersensibilidade. Foram classificados como bactérias do tipo Gram negativas. Sete diferentes espécies foram identificadas: Salmonella sp, Pseudomonas huttiensis; Enterobacter cloacae, Enterobacter gergoviae, Paenibacillus polymyxa; Erwinia chrysanthemi biovar IV, e Klebsiella pneumoniae. Ao final do 4º subcultivo da ‘Tropical’ foram produzidas 281,07 plântulas na concentração de 6,5 mg L-1 de BAP. A maior taxa de multiplicação foi obtida na dose de 7,0 mg L-1 , no 2º subcultivo, com média de 5,50 explantes. A ‘Galil 18’ apresentou diferença significativa menor que a testemunha no 2º subcultivo, com taxa multiplicativa média de 1,84 explantes. A análise de desdobramento apresentou efeito significativo (p ≤ 0,05) das doses sobre o comprimento do pseudocaule das plântulas in vitro. Para a ‘Tropical’ foi observada incrementos no comprimento até a dose de 6,5 mg L-1 . Em relação ao diâmetro do pseudocaule, a ‘Galil 18’ apresentou incrementos no diâmetro até 5,9 mg L-1 de BAP, enquanto a ‘Tropical’ demonstrou incrementos lineares da ordem de 0,0241 cm para cada 1,0 mg L-1 de BAP adicionado. Após aclimatização não foram observados efeitos significativos para o comprimento do pseudocaule nas plântulas da ‘Galil 18’. Na ‘Tropical’ a dose de 5,5 mg L-1 proporcionou maior crescimento das plântulas, 5,16 cm, trinta dias após a aclimatização. Os resultados do presente estudo demonstraram a grande diversidade de espécies de bactérias e a necessidade de desenvolvimento de protocolos de assepsia específicos para as diferentes cultivares de bananeira. Em relação ao BAP não houve efeito das doses para a maioria das características da ‘Galil 18’, entretanto doses de BAP entre 6,5 e 7,0 mg L-1 promoveram a maior produção de mudas e maior taxa de multiplicação in vitro na ‘Tropical’, respectivamente.
Endophytic bacteria in explants and micropropagation of tetraploid banana
The work was carried out at Campus from Janaúba of the Universidade Estadual de Montes Claros with the purpose of evaluating two asepsis protocols and one of multiplication in vitro of the cultivars Galil 18 and Tropical as well as to identify, in species level, the isolated of bacteria coming from contaminations of the shoot tip apices of those cultivars. The cultivars’ explants were submitted to two asepsis protocols, DES1 and DES2, and to four different concentrations of BAP 1,0; 3,0; 7,0 and 9,0 mg L-1 and one more control dose of 5,0 mg L-1 of 6- benzilaminopurine. The characteristics of contamination percentage, multiplication rate, total number of explants, length and diameter of the pseudostem of the plants in vitro and in the acclimatization phase were appraised. The contaminations were exclusively from bacterial source. Significant differences were observed between the asepsis methods just for the Tropical (χ 2 = 0,0291). The method of asepsis 2 provided the smallest index of contamination, with average of 7,14%. None of the twelve evaluated isolated presented hypersensitivity reaction. They were classified as bacteria of the type Gram negatives. Seven different species were identified: Salmonella sp., Pseudomonas huttiensis, Enterobacter clocae, Enterobacter gergoviae, Paenibacillu polymyxa; Erwinia chrysanthemi biovar IV, and Klebsiella pneumoniae pneumoniae. At the end of the 4 nd subculture of the ‘Tropical’, 281,07 plantules were produced in the concentration of 6,5 mg L-1 of BAP. The greatest multiplication rate was obtained in the dose of 7,0 mg L-1 , in the 2 nd subculture, with average of 5,50 explants. Galil 18 presented smaller significant difference than the control in the 2 nd subculture, with medium multiplicative rate of 1,84 explants. The unfolding analysis presented significant effect (p ≤ 0,05) of the doses on the length until the dose 6,5 mg L-1 . In relation to the pseudostem diameter, ‘Galil 18’ presented increments in until 5,9 mg L-1 of BAP, while the ‘Tropical’ demonstrated lineal increments around 0,0241 cm for each 1,0 mg L-1 of added BAP. After the acclimatization, significant effects were not observed for the pseudostem length in the plantules of ‘Galil 18’. In the ‘Tropical’, the dose of 5,5 mg L-1 provided larger growth in the plantules, 5,16 cm, thirty days after the acclimatization. The results of the present work demonstrated the great diversity of bacteria’s species and the need of development of specific asepsis protocols for the different banana cultivars. Concerning to BAP, there was not effect of the doses for most of the characteristics of ‘Galil 18’; however, dose between 6,5 and 7,0 mg L-1 promoted the largest production of plants and larger rate of in vitro multiplication in the ‘Tropical’, respectively.
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